2つのチーム（RaidiantとDire）が5対5に分かれて戦うマルチプレイヤーオンラインバトルアリーナである。互いのチームが敵のタワーを破壊しつつ、敵のエンシェント（本陣）を先に破壊した方が勝利となる。どちらかのチームのプレイヤーが全員抜けてしまった場合は不戦勝となる。このゲームには、ヒーロー以外にコンピューターが自動生成して敵の本陣を破壊しようとする、クリープという生物が存在する。このクリープは初期時は通常クリープだが、どちらかのチームが1つの（遠距離または近距離）バラックを破壊すると、それに応じたスーパークリープという生物が生成される。このバラックがすべて破壊されると、メガクリープという生物が生成されるようになる。このメガクリープは、ヒーローと同じような破壊力を持つため、メガクリープが生成されるようになると大抵の試合は終局を迎える。クリープは敵本陣を攻めるクリープだけではなく、レーンとレーンの間にあるジャングルと呼ばれる場所にニュートラルアイテムをドロップするクリープが存在する。そのニュートラルアイテムは、バックパックかニュートラルアイテム専用の枠（1つだけ）にしか入れられないが、「アーマー+」や「移動速度+」など役に立つ効果が付属していることがある。中立クリープの中にはロシャンという巨大な怪物が存在する。このロシャンを倒すと一度死んでもその場で生き返るAegis of Immortal（日本語表記ではエージス）が手に入る。通常、このエージスはロシャンを倒したチームが手に入れられるが、何らかの方法で、倒したチームが手に入れる前にもう一方のチームが盗むことも可能である。 このロシャンはVersion 7.00以前はDire寄りに位置していたが、Version 7.00以後はDire及びRadiantの間にロシャンピットがあり、その中に存在する。ロシャンはVersion 7.31d時点では視覚で確認できるワードユニットを一度の攻撃で破壊できる仕様になっている。各ヒーローが4つ程度持つ固有の技。Aghanim's ScepterやAghanim's Shardを使うことで新しいアビリティーの追加や既存のアビリティーの強化などができる。アビリティーアイコンの左にある木の形をしたタレントツリーでアビリティーの持続時間を延長したりヘルス（HP）やマナの容量を増やすことができる。アビリティー使用には基本的にマナを消費する。アビリティーによってはヘルスを消費するものもある。アビリティーは大まかに分けてアクティブスキルとパッシブスキルに分かれる。アクティブスキルは発動することで効果を発揮するがパッシブスキルは常時もしくは特定の状態で自動発動する。毎年8月に開催されるThe Internationalは世界最高賞金額の大会であり、Dota 2の頂点を決める最高峰の大会でもある。ほかにメジャー大会も年数回実施されている。